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        當(dāng)前位置:首頁  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  PCR檢測試劑盒  -  50T豬痢疾短螺旋體PCR檢測試劑盒廠家

        豬痢疾短螺旋體PCR檢測試劑盒廠家

        產(chǎn)品簡介

        豬痢疾短螺旋體PCR檢測試劑盒廠家
        上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
        IL-7檢測試劑盒
        HHV8/ORF K2/vIL-6(Human herpesvirus 8) 人類皰疹病毒8抗原
        HIF-1Alpha 缺氧誘導(dǎo)因子1α 多肽

        更新時(shí)間:2021-03-14
        訪問次數(shù):549
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        注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

         產(chǎn)品名稱

         豬痢疾短螺旋體PCR檢測試劑盒廠家

         英文名稱

         Brachyspira hyodisenteriaePCR

         貨號(hào)

         LZP6506

        組成及試劑配制:
        1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
        2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
        3、 樣品稀釋液:1×20ml。
        4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
        5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
        ?
        實(shí)驗(yàn)過程:
        一、試劑準(zhǔn)備
        1. DNA模板
        2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
        3.10×PCR Buffer
        4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
        5.Taq酶
        二、操作步驟
        1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
        dNTP mixl                 4μl
        引物1(10pM)               2μl
        引物2(10PM)              2μl
        Taq酶(2U/μl)            1μl
        DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
        ddH2O至               50 μl
        PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
        2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
        3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
        4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
        三、注意事項(xiàng)
        1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
        2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
        3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
        4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
        5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
        6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
        7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
        人尿道上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基價(jià)格Anti-Mesp2 Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶  

        人臍靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書Anti-MET Antibody研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞膜受體  

        人脈絡(luò)膜微血管細(xì)胞*培養(yǎng)基價(jià)格Anti-MET Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶 合成與降解 糖尿病 新陳代謝  

        大鼠氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基報(bào)價(jià)Anti-MFAP5 Antibody研究領(lǐng)域

        大鼠角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基現(xiàn)貨供應(yīng)Anti-METTL3 Antibody研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 通道蛋白 細(xì)胞膜受體

        小鼠胰腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基價(jià)格Anti-MFN1 Antibody研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 細(xì)菌及

        小鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基現(xiàn)貨供應(yīng)Anti-MFGE8 Antibody研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 細(xì)菌及

        4-(E)-2-(3,5-二羥基苯基)乙烯基苯-1,3-二醇29700-22-9*Anti-MGA Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué)

        薯蕷次苷A19057-67-1*Anti-MFN2 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 生長因子和激素

        白麻苷18609-17-1實(shí)驗(yàn)方法Anti-MGMT Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞周期蛋白 通道蛋白

        左旋千金藤啶堿16562-13-3價(jià)格Anti-mGluR1/GRM1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子

        阿魏酸1135-24-6實(shí)驗(yàn)步驟Anti-MGMT Antibody研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 通道蛋白 細(xì)胞膜受體

        表沒食子兒茶素970-74-1實(shí)驗(yàn)方法Anti-MGP Antibody(原貨號(hào)PB1003)研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 細(xì)菌及 細(xì)胞表面分子 糖蛋白

        大豆苷552-66-9 價(jià)格Anti-MICA Antibody研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 細(xì)菌及

        丹參酚酸B甲酯122021-74-3價(jià)格Anti-MGST1 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 脂蛋白

        價(jià)酸88%fonmi ei7AR500ml

        P2636-25MGPoly-L-Lysine L-多聚賴安酸 3-7萬--25mg38

        G6752-5GGuasine 鳥苷118-00-35g

        PVP抗熒光淬滅封片液5ml

        MU-Gal

        ¤metxyl alcoholHPLC500ml

        JB01010.2 ml 硅化薄壁管237

        S0639-50Gwo7ium Azide 疊淡鈉44448-44-850g

        D-(+)-Galactose100g

        聚蔗糖70100g

        大鼠胰島素受體底物1(IRS-1)ELISA試劑盒 ,英文名: IRS-1 ELISA Kit

        人抗麥膠蛋白/麥醇溶蛋白抗體(AGA)ELISA檢測試劑盒Humanai-gliadinaibody,AGAELISAKit 96T/48T

        大鼠α肌動(dòng)蛋白(α Actin)免疫試劑盒 Rat Alpha-Actin,α Actin ELISA Kit

        CLIAKitforSTK(Humanserine/threonineproteinkinase)ELISAKit人絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶規(guī)格:48T/96T

        人體組織N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2(NAT2)活性比色法定量檢測試劑盒20次

        ELISAKitSc1-70-Ab人抗Sc1-70抗體規(guī)格:48T/96T
        豬痢疾短螺旋體PCR檢測試劑盒廠家人心肌細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

        人牙髓干細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶

        人牙齦上皮細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

        人牙周膜成纖維細(xì)胞,HPLFC細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶

        人牙周膜干細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶

        人羊膜上皮細(xì)胞,HAECM細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
        檢測步驟:
        一、 試劑的準(zhǔn)備
        從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
        設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
        試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
        熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
        酶混合物 1 µL N×1 µL
        總量 15 µL N×15µL
        1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
        7.2 qPCR反應(yīng)條件
        將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
        推薦循環(huán)條件:
        1循環(huán) 50℃ for 2 min
        預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
        PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
        60℃ for 60 sec
        60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

         

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