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        動物源性成分(S)PCR檢測試劑盒廠家

        產(chǎn)品簡介

        動物源性成分(S)PCR檢測試劑盒廠家
        上海聯(lián)祖生物相關產(chǎn)品:
        AVP檢測試劑盒 結合物及標本的稀釋液;洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;

        更新時間:2021-03-13
        訪問次數(shù):620
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        注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。

         產(chǎn)品名稱

         動物源性成分(S)PCR檢測試劑盒廠家

         規(guī)格

         50T

         貨號

         LZP7562

        實驗過程:
        一、試劑準備
        1. DNA模板
        2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
        3.10×PCR Buffer
        4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
        5.Taq酶
        二、操作步驟
        1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
        dNTP mixl                 4μl
        引物1(10pM)               2μl
        引物2(10PM)              2μl
        Taq酶(2U/μl)            1μl
        DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
        ddH2O至               50 μl
        PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
        2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
        3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
        4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
        三、注意事項
        1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
        2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
        3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
        4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
        5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
        6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
        7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
        一、 試劑的準備
        從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
        設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
        試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
        熒光PCR反應液 14µL N×14µL
        酶混合物 1 µL N×1 µL
        總量 15 µL N×15µL
        1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
        7.2 qPCR反應條件
        將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內(nèi)。
        推薦循環(huán)條件:
        1循環(huán) 50℃ for 2 min
        預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
        PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
        60℃ for 60 sec
        60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
        組成及試劑配制:
        1、酶標板:一塊(96孔)
        2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
        3、 樣品稀釋液:1×20ml。
        4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
        5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
        Bees wax,white3-溴-5-氯吡啶 97%十氫萘 98%

        Ceresin5-溴-2-基吡啶 97%十氫萘 Standard for GC,>99.7%(GC,cis+trans)

        Paraffin with ceresin2-溴-3-吡啶甲 97%十氫萘 99%

        Bergamot Oil5-溴-1-戊烯 95%異辛酸  >99.0% (GC)

        Castor oil2-芐氧基溴乙烷 97%1,2-乙二硫 97%

        Cinnamon oiln-BOC-1,6-二氨基己烷鹽酸鹽 97%甘油  ≥99.5%(GC)

        Clove oil8-溴喹啉 97%正己酸 AR,99.0%

        Cedarwood oil2-(2-溴乙基)四氫-2H-吡喃 96%1,6-己二 98%

        Olive oil對氟溴苯 98%六亞甲基二異酸酯 99%

        Gum dammar正丁基氯化鎂 2.0 M THF溶液異丁酸 99%

        Gum mastic叔丁基氯化鎂 1.0 M in THF異佛爾酮二異酸酯  99%

        Gum sandarac叔丁基氯化鎂 2.0 M 乙溶液新戊二 99%

        Shellac2-溴苯胺 99%壬酸 97%

        Gum copal乙基叔丁基 97%正辛酸 AR,99%

        Neutral balsam2-溴吡啶 98%1,2- AR,99%

        Aerosol OT炔酸叔丁酯 98%紅鋁溶液 70 wt%甲苯溶液

        2-萘甲酸(>98.0%(GC)(T))Phospho-p53 (Ser15) (16G8) Mouse mAb (Biotinylated)Integrin alpha 2b/CD41  血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗體

        2-萘甲酰氯(>98.0%(GC)(T))CaMKIV AntibodyIntegrin alpha 2/CD49b  整合素α2抗體

        4-甲酸(>99.0%(GC)(T))Phospho-Met (Tyr1234/1235) (D26) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)Integrin alpha 1/CD49a  整合素α1抗體

        聯(lián)苯基-4-羧酸(>98.0%(T))CREB (48H2) Rabbit mAb (Biotinylated)Insulin(1G11)  重組人胰島素單克隆抗體

        4-苯基苯甲酰氯(>98.0%(GC)(T))ROCK1 (C8F7) Rabbit mAbInsulin(1D4:)  豬胰島素單克隆抗體

        4-二甲基氨基肉桂(>98.0%(T))ROCK1 (C8F7) Rabbit mAbInsulin Receptor/CD220  胰島素受體抗體

        2,3-萘二羧酸酐(>95.0%(GC)(T))HMGCS2 (D8B5M) Rabbit mAbInsulin Receptor R  胰島素受體相關受體抗體

        N-(叔丁氧羰基)-1,2-二氨基乙烷(>97.0%(GC))Phospho-BCKDH-E1α (Ser293) (E2V6B) Rabbit mAbInsulin Receptor Beta  胰島素受體β抗體

        4-[(叔丁氧羰氨基)甲基]吡啶-2-羧酸(>96.0%(HPLC)(T))KLF4 AntibodyInsulin Receptor alpha  胰島素受體α抗體

        (鋅卟啉)(約5μmol/L的二氯溶液) KLF4 AntibodyInsulin Receptor Alpha  胰島素受體α抗體
        動物源性成分(S)PCR檢測試劑盒廠家人免疫抑制酸性蛋白(IAP)ELISA試劑盒英文名稱:Human immusuppressive acidic protein,IAP ELISA Kit進口/分裝

        人苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒英文名稱:Human Leptin receptor,LR/Ob-R ELISA Kit 進口/原裝

        人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA試劑盒英文名稱:Human Mullerian Inhibiting Substance/Anti-Mullerian hormone,MIS/AMH ELISA Kit*

        人膜輔蛋白(MCP/CD46)ELISA試劑盒 英文名稱:Human membrane cofactor protein,MCP ELISA Kit進口/分裝

        人膜攻擊復合物(MAC)ELISA試劑盒 英文名稱:Human membrane attack complex,MAC ELISA Kit*

        人膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Annexin Ⅴ,ANX-Ⅴ ELISA Kit 進口/原裝小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒      組裝/原裝

        小鼠Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢ)ELISA試劑盒      組裝/原裝

        小鼠Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA試劑盒      組裝/原裝

        小鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒      組裝/原裝         

         

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