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        土拉桿菌PCR檢測試劑盒說明書

        產(chǎn)品簡介

        蚜滅標準溶液(0.100mg/ml)Phospho-HSP27 (Ser82) Antibody II7-羥基-1H-吲唑

        L-腎上腺素ELISA試劑盒HCMV UL23 巨細胞病毒UL23100 ul

        L-酸脫氫酶(L-LDH)ELISA試劑盒HCMV UL49 巨細胞病毒UL49蛋

        更新時間:2021-03-13
        訪問次數(shù):500
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        組成及試劑配制:
        1、酶標板:一塊(96孔)
        2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
        3、 樣品稀釋液:1×20ml。
        4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
        5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
        注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。

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         產(chǎn)品名稱

         土拉桿菌PCR檢測試劑盒說明書

         規(guī)格

         50T

         貨號

         LZP7823

        實驗過程:
        一、試劑準備
        1. DNA模板
        2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
        3.10×PCR Buffer
        4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
        5.Taq酶
        二、操作步驟
        1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
        dNTP mixl                 4μl
        引物1(10pM)               2μl
        引物2(10PM)              2μl
        Taq酶(2U/μl)            1μl
        DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
        ddH2O至               50 μl
        PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
        2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
        3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
        4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
        三、注意事項
        1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
        2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
        3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
        4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
        5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
        6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
        7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
        一、 試劑的準備
        從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
        設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
        試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
        熒光PCR反應液 14µL N×14µL
        酶混合物 1 µL N×1 µL
        總量 15 µL N×15µL
        1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
        7.2 qPCR反應條件
        將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內(nèi)。
        推薦循環(huán)條件:
        1循環(huán) 50℃ for 2 min
        預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
        PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
        60℃ for 60 sec
        60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
        釹標準溶液(1000µg/mL,基體:10%HCl)FastScan™ Total Zap-70 ELISA Kit2--吡啶

        標準溶液(100µg/mL,基體:1%HCl)Wnt5a Antibody5-溴-6-煙酸甲酯

        標準溶液(1000μg/ml,,溶劑:水)PDE5 Antibody5-溴-2-煙酸甲酯

        鐠標準溶液(1000µg/mL,基體:10%HCl)MBP Tag (8G1) Mouse mAb4,4'-二酰聯(lián)

        硒標準溶液(100mg/L,溶劑:水)PhosphoPlus® ULK1 (Ser757) Antibody Duet氨基-基吡啶

        鍶標準溶液(1000μg/ml)Vav3 Antibody2,二

        鈦標準溶液(100µg/ml)Rap1A/Rap1B (26B4) Rabbit mAb1-(2-氟-5-基)-1-酮

        鎢標準溶液(1000μg/ml,基體:0.1mol/LNaOH)Synip (C51G6) Rabbit mAb5-羥基-1,二

        鉭標準溶液(1000μg/ml)Phospho-HSP27 (Ser82) Antibody2-溴噻吩-5-甲

        碲標準溶液(1000μg/ml)Phospho-HSP27 (Ser82) AntibodyN-甲基-2-甲氧基芐

        鋱標準溶液(1000µg/mL,基體:10%HCl)HSP27 (G31) Mouse mAb2-氟-6-溴

        釩標準溶液(1000μg/ml,溶劑:0.5mol/L HNO3)HSP27 (G31) Mouse mAb6-溴吲唑

        釔標準溶液(1000μg/ml in 10% HCl)BCAR3 Antibody異基酸

        鋅標準溶液(1000μg/ml,基體:1mol/L HNO3)Phospho-HSP27 (Ser15) AntibodyN-CBZ-哌啶酸酯

        鋅標準溶液(100µg/ml,,基體:1%HNO3)Phospho-HSP27 (Ser15) Antibody氨基基酸

        化鋅標準溶液(0.1000mol/L)Phospho-HSP27 (Ser78) Antibody2-氨基-氟

        鄰二甲(for HPLC,≥96.0% (GC))Phospho-HSP27 (Ser78) Antibody5-溴-2-甲氧基甲

        蚜滅標準溶液(0.100mg/ml)Phospho-HSP27 (Ser82) Antibody II7-羥基-1H-吲唑

        L-腎上腺素ELISA試劑盒HCMV UL23  巨細胞病毒UL23100 ul

        L-酸脫氫酶(L-LDH)ELISA試劑盒HCMV UL49  巨細胞病毒UL49蛋白100 ul

        L-氨基酸氧化酶(LAO)ELISA試劑盒MCP-1/CCL2  單核細胞趨化蛋白1(大、)100 ul

        Klotho ELISA試劑盒MCP-1/CCL2  單核細胞趨化蛋白1()100 ul

        KI-67抗原(Ki-67)ELISA試劑盒MCP-2/CCL8  單核細胞趨化蛋白2()100 ul

        Jo1/抗組氨酰tRNA合成酶(Jo1/HRS)ELISA試劑盒MCP-2/CCL8  單核細胞趨化蛋白2(大、)20 ul

        IV形膠原蛋白α3鏈(COL4A3)ELISA試劑盒MCP-3/CCL7  單核細胞趨化蛋白3100 ul

        Igγ3鏈C區(qū)(IGHG3)ELISA試劑盒MCP-3/CCL7  單核細胞趨化蛋白3100 ul

        ICOS配體(ICOSLG)ELISA試劑盒CCL9/CCL10  巨噬細胞炎癥蛋白-1γ100 ul
        土拉桿菌PCR檢測試劑盒說明書1號染色體開放閱讀框86抗體Salaspermic acid中文名:大子五層龍酸別名:分子式:C30H48O4

        8號染色體開放閱讀框59抗體Quillaic acid中文名:皂樹酸別名:分子式:C30H46O5

        磷酸化CD151抗體Rubiprasin A中文名:別名:分子式:C32H52O5

        殺菌肽/天蠶抗菌肽單克隆抗體Ginseside Rb1中文名:人參皂苷Rb1別名:Gypeside III分子式:C54H92O23

        細胞周期蛋白依賴性激酶樣3抗體Rubiprasin B中文名:別名:分子式:C32H52O4

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