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        產(chǎn)品中心

        Product Center

        當(dāng)前位置:首頁  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  熒光-PCR法  -  48T豬肺炎支原體(MHP)核酸試劑盒價格

        豬肺炎支原體(MHP)核酸試劑盒價格

        產(chǎn)品簡介

        第八凝血因子/第八因子相關(guān)抗原抗體1-Acetylpiperazine中文名:1-乙酰別名:分子式:C6H12N2O

        凝血因子11重鏈抗體(1S,2R)-2-Ami-1,2-diphenylethal中文名:(1S,2R)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇別名:分子式:C14H15

        凝血因子12輕鏈抗體

        更新時間:2021-03-13
        訪問次數(shù):688
        詳細(xì)介紹在線留言

        注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

         產(chǎn)品名稱

         豬肺炎支原體(MHP)核酸試劑盒價格

         規(guī)格

         48T

         貨號

         LZP7973

        組成及試劑配制:
        1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
        2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
        3、 樣品稀釋液:1×20ml。
        4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
        5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
        ?
        實驗過程:
        一、試劑準(zhǔn)備
        1. DNA模板
        2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
        3.10×PCR Buffer
        4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
        5.Taq酶
        二、操作步驟
        1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
        dNTP mixl                 4μl
        引物1(10pM)               2μl
        引物2(10PM)              2μl
        Taq酶(2U/μl)            1μl
        DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
        ddH2O至               50 μl
        PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
        2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
        3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
        4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
        三、注意事項
        1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設(shè)立一個的PCR實驗室。
        2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
        3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
        4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
        5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
        6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
        7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
        孔雀石綠PKM2 (D78A4) XP® Rabbit mAbL-賴氨酸

        燦爛綠,亮綠Phospho-Drosophila Akt (Ser505) Antibody6-甲氧基-2,3,4,5-四氫吡啶

        甲基綠THEX1 (D66A11) Rabbit mAb2,二-5-甲基吡啶

        茜素綠;酸性綠25Phospho-Akt (Thr308) (244F9) Rabbit mAb(R)-縮水甘油

        萘酚綠BPhospho-Akt (Thr308) (244F9) Rabbit mAb氧甲酰基亞基三基膦

        固綠FCFPhospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb甲酸

        子種綠A;藍(lán)APhospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb2-甲氧基基酸

        亮綠SF(淡黃)Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb甲氧基酸

        健那綠BAkt3 Antibody2,3,4,6-四酰氧基-alpha-D-吡喃葡萄糖溴化物

        酸性綠3CNOT3 (D4K4N) Rabbit mAb1-叔丁氧羰基哌

        酸性綠 50 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb-2-吡啶甲酸

        酸性綠APhospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb2-溴蒽醌

        吲哚菁綠Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAbN-BOC-GAMMA-氨基丁酸

        靛藍(lán)N-Cadherin Antibody9-溴菲

        甲基藍(lán)CD6 (E9Y7Y) Rabbit mAb戊鈉

        伊文思藍(lán);埃文斯藍(lán)MST3b Antibody2-氨基--6-甲氧基嘧啶

        曲利藍(lán)LSD1 (1B2E5) Mouse mAb5--2-氟

        維多利亞藍(lán)B,性藍(lán) 26CXXC1 (D1R5R) Rabbit mAb2-溴-5-氟

        N-甲基-D-天門冬氨酸(NMDA)受體亞單位NR2 ELISA試劑盒TRBF1/TRF1  端粒體復(fù)制結(jié)合因子1100 ul

        N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒TREM1  髓系細(xì)胞觸發(fā)受體1100 ul

        NOGO-A ELISA試劑盒TREM2  髓系細(xì)胞觸發(fā)受體220 ul

        Na-K-ATP酶ELISA試劑盒TREML1/TLT1  髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子1100 ul

        NAD(P)H脫氫酶(醌)1(NQO1)ELISA試劑盒TREML2/TLT2  髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子2100 ul

        M型肌酸激酶(CKM)ELISA試劑盒Transferrin  轉(zhuǎn)鐵蛋白100 ul

        L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒TRF2  端粒結(jié)合蛋白2100 ul

        L-酸脫氫酶(L-LDH) ELISA試劑盒omerase Binding Proin, P23  端粒酶結(jié)合蛋白P23100 ul

        KiSS-1受體(KISS1R)ELISA試劑盒TRIM32  TRIM3220 ul
        豬肺炎支原體(MHP)核酸試劑盒價格纖維母細(xì)胞生長因子受體底物3抗體7-Acetoxy-4-methylcoumarin中文名:7-乙酰氧基-4-甲基別名:分子式:C12H10O4

        纖維連接蛋白抗體Adresterone中文名:腎上腺甾酮別名:分子式:C19H24O3

        凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關(guān)抗原抗體1-Acetylpiperazine中文名:1-乙酰別名:分子式:C6H12N2O

        凝血因子11重鏈抗體(1S,2R)-2-Ami-1,2-diphenylethal中文名:(1S,2R)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇別名:分子式:C14H15

        凝血因子12輕鏈抗體2-Acetylbutyrolactone中文名:2-乙酰基丁內(nèi)酯別名:分子式:C6H8O3
        檢測步驟:
        一、 試劑的準(zhǔn)備
        從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
        設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
        試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
        熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
        酶混合物 1 µL N×1 µL
        總量 15 µL N×15µL
        1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
        7.2 qPCR反應(yīng)條件
        將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
        推薦循環(huán)條件:
        1循環(huán) 50℃ for 2 min
        預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
        PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
        60℃ for 60 sec
        60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

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