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        產(chǎn)品中心

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        當(dāng)前位置:首頁(yè)  -  產(chǎn)品中心  -  PCR試劑盒  -  熒光-PCR法  -  48T豬流感(SIV)核酸試劑盒規(guī)格

        豬流感(SIV)核酸試劑盒規(guī)格

        產(chǎn)品簡(jiǎn)介

        假性血友病因子/血管性血友病因子100 ul

        白介素15(IL-15)ELISA試劑盒V.cholera Ogawa 01群稻葉型霍亂弧菌300 ul

        β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒V.cholera Ogawa 01群小川型霍亂弧菌100 ul

        α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒WEE1 proin WEE1蛋白300 ul

        Tau蛋白ELISA試劑盒

        更新時(shí)間:2021-03-13
        訪問(wèn)次數(shù):661
        詳細(xì)介紹在線留言

        注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

         產(chǎn)品名稱

         豬流感(SIV)核酸試劑盒規(guī)格

         規(guī)格

         48T

         貨號(hào)

         LZP7996

        組成及試劑配制:
        1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
        2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
        3、 樣品稀釋液:1×20ml。
        4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
        5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
        ?
        實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
        一、試劑準(zhǔn)備
        1. DNA模板
        2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
        3.10×PCR Buffer
        4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
        5.Taq酶
        二、操作步驟
        1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
        dNTP mixl                 4μl
        引物1(10pM)               2μl
        引物2(10PM)              2μl
        Taq酶(2U/μl)            1μl
        DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
        ddH2O至               50 μl
        PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
        2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
        3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
        4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
        三、注意事項(xiàng)
        1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
        2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
        3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
        4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
        5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
        6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
        7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
        鹽酸馬尼地平Rab10 Antibody2-酰

        鹽酸馬尼地平(標(biāo)準(zhǔn)品)PI3 Kinase Class III (D9A5) Rabbit mAbD-溴氨酸

        二氫睪酮,雄諾龍F(tuán)XR1 (L662) Antibody甲巰脯酸

        多拉菌素STOP (175) Mouse mAb2,二甲基吡咯

        3,3,5-三-L-甲狀腺原氨酸,塞羅寧SOD1 (71G8) Mouse mAb甲氧基芐硫

        Corylifol A(標(biāo)準(zhǔn)品)SOD1 (71G8) Mouse mAb2,5-二甲基呋喃

        溴芬酸鈉EGF Receptor (D38B1) XP® Rabbit mAb氟

        溴芬酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)EGF Receptor (D38B1) XP® Rabbit mAb間

        鹽酸氟哌噻噸EGF Receptor (D38B1) XP® Rabbit mAb間二甲

        茶多酚;綠茶提取物Fer (5D2) Mouse mAb1,3,5-三溴

        四氫姜黃素 Ron (1B5) Mouse mAb2,二羥基-6-甲基嘧啶

        管花苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)Non-phospho (Active) β-Canin (Ser33/37/Thr41) Antibody甲基哌啶

        2’-酰基毛蕊花糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)THEM2 AntibodyN-甲基哌啶

        2-[2-(2,2,2-三氟氧基)氧基]基溴 WASP (D9C8) Rabbit mAbL-高胱氨酸

        吡咯喹啉醌;維生素tochrome c Antibody己二酸單酯

        吡咯喹啉醌二鈉鹽;維生素鹽Cytochrome c Antibody1-(基)哌

        鹽酸右美托咪定CDK4 (D9G3E) Rabbit mAb (PE Conjuga)甲酸酯

        地夫可特ATP2A1/SERCA1 (A988) Antibody溴-1-

        白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒VTG  魚、青鳉魚卵黃蛋白原300 ul

        白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒VWF  血管假性血友病因子/血管性血友病因子100 ul

        白介素15(IL-15)ELISA試劑盒V.cholera Ogawa  01群稻葉型霍亂弧菌300 ul

        β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒V.cholera Ogawa  01群小川型霍亂弧菌100 ul

        α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒WEE1 proin  WEE1蛋白300 ul

        Tau蛋白ELISA試劑盒Phospho-Wee1 (Ser642)  酸化WEE1蛋白100 ul

        N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒WNK1  賴氨酸缺陷型蛋白激酶1100 ul

        猴腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒Phospho-WNK1 (Thr60)  賴氨酸缺陷型蛋白激酶1300 ul

        猴脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒WNK4  WNK4100 ul
        豬流感(SIV)核酸試劑盒規(guī)格長(zhǎng)鏈脂肪酸延長(zhǎng)酶長(zhǎng)ELOVL6抗體2,6-Bis(hydroxymethyl)-p-cresol中文名:2,6-雙(羥甲基)對(duì)甲酚別名:分子式:C9H12O3

        酪氨酸蛋白激酶受體A6抗體3,9-Bis(2-cyaethyl)-2,4,8,10-tetraoxaspiro[5.5]undecane中文名:3,9-雙(3-氰乙基)-2,4,8,10-四氧雜螺[5.5]十一烷別名:CTU分子式:C13H18N2O4

        酪氨酸蛋白激酶受體A3抗體2,2'-Dithiobisbenzanilide中文名:2,2'-二苯甲酰氨基二苯二硫別名:分子式:C26H20N2O2S2

        酪氨酸蛋白激酶受體A7抗體Dimethylolurea中文名:雙羥甲脲別名:分子式:C3H8N2O3

        酪氨酸蛋白激酶受體B1抗體4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene中文名:4,4'-雙(2-苯并惡唑基)芪別名:熒光增白劑 OB-1分子式:C28H18N2O2
        檢測(cè)步驟:
        一、 試劑的準(zhǔn)備
        從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
        設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
        試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
        熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
        酶混合物 1 µL N×1 µL
        總量 15 µL N×15µL
        1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
        7.2 qPCR反應(yīng)條件
        將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
        推薦循環(huán)條件:
        1循環(huán) 50℃ for 2 min
        預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
        PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
        60℃ for 60 sec
        60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

         

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