樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（2）血漿：

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（3）尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：

檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。

（5）培養(yǎng)細(xì)胞

檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（6）組織標(biāo)本

切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

產(chǎn)品屬性：

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

操作步驟：

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

標(biāo)本要求：

1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

需要而未提供的試劑和器材：

1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀

2. 高速離心機(jī)

3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱

4. 干凈的試管和Eppendof管

5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時(shí)，用多通道移液器

6. 蒸餾水，容量瓶等。

備試劑與收集血樣：

1.  收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時(shí)；更長時(shí)間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復(fù)凍融。

2.  標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管，管加標(biāo)本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

3.  10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。

4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）

CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)試劑盒蕨內(nèi)酰2,5-二 99%二 98%

CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)試劑盒咖啡二十二酯4-(2-羥乙)-1-哌磺 ≥99.0% (T) 二乙 98%

CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)試劑盒咖啡樺木酯2--4- 99%二乙酯 97%

CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)試劑盒咖啡羽扇豆4--2- 98%二氟乙酯 98%

2,3-二磷甘油(2,3-DPG)試劑盒堪非 3-O-阿拉伯糖4--2- 分析標(biāo)準(zhǔn)品二溴乙酯 97%

2,3-二磷甘油(2,3-DPG)試劑盒柯托2-氧-4- 99%溴乙酯 97%

膜聚糖/內(nèi)腔蛋白(LUM)試劑盒苦瓜皂 G4-氧-2- 99%三乙酯 99%

膜聚糖/內(nèi)腔蛋白(LUM)試劑盒苦木西 I鄰苯 CP,98%乙酯 98%

Na+/H+交換體3(NHE3)試劑盒苦木西 S對苯 AR,99.0%二氟溴乙乙酯 97%

Na+/H+交換體3(NHE3)試劑盒苦杏 A磷二氫鈉 CP4,4,4-三氟乙酰乙乙酯 98%

孤腓肽(OFQ/N)試劑盒苦杏 B磷氫二鈉，十二水 CP，98%氟乙 98%

孤腓肽(OFQ/N)試劑盒闊葉辛鈉 99%2-氟乙  95%

質(zhì)裂解素(ST1)試劑盒 蠟果楊梅 B異叉 Standard for GC，≥98%（GC)酯 99%

質(zhì)裂解素(ST1)試劑盒 蠟果楊梅 C異叉 95%二氟鈉 97%

質(zhì)裂解素(ST2)試劑盒 三萜 A異叉 90%2,2,3,3-四氟 98%

質(zhì)裂解素(ST2)試劑盒 雷醌內(nèi)酯異叉 ≥90%三乙 98%
FT4游離甲狀腺素ELISA試劑盒抗酒石性磷酶主要存在于正常人肺泡巨噬細(xì)胞等部位的TRAP和存在于細(xì)胞白血病人脾臟TRAP 均在細(xì)胞濾泡中，并不釋放入血液，血液中TRAP 絕大部分來源于破骨細(xì)胞。因而測量血液中TRAP可以了解破骨細(xì)胞的功能狀態(tài)。

在堿性的緩沖液中，細(xì)胞內(nèi)性磷酶催化底物水解，其生成物進(jìn)而與一種穩(wěn)定的重氮鹽偶聯(lián)，生成不溶性的偶氮染料沉淀，當(dāng)?shù)孜镏写嬖诰剖瘯r(shí)，該反應(yīng)只出現(xiàn)在特異性細(xì)胞中。

本試劑盒適用于細(xì)胞涂片、細(xì)胞爬片、血涂片、骨髓涂片、冰凍切片及石蠟切片等的染色。陽性反應(yīng)為鮮紅色或深紅色顆粒，定位于胞漿當(dāng)中。

儲(chǔ)存條件及有效期：2-8℃保存；三個(gè)月。