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        PCS-3M細(xì)胞

        產(chǎn)品簡介

        PCS-3M細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
        磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體CD33/Siglec-3(mouse ret) CD33抗原(大、小鼠)
        磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體CD34 CD34抗原(表面的唾液粘蛋白)

        更新時(shí)間:2021-08-30
        訪問次數(shù):747
        詳細(xì)介紹在線留言

        產(chǎn)品名稱:PCS-3M前列腺癌細(xì)胞
        英文簡稱:PCS-3M細(xì)胞

        貨號(hào):LZ-X969351
        規(guī)格:T25
        生長特性:貼壁生長 

        圖片2.jpg 

        我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià),產(chǎn)品貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。

        凍存培養(yǎng)基:
        凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
        1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
        2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
        培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
        以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
        1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
        2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
        3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
        4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
        注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
        5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
        6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
        7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

        圖片2.jpg 

        實(shí)驗(yàn)材料: 
        1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
        2. 100ml滅菌燒杯2個(gè);
        3、50ml離心筒2個(gè) 
        4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
        5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
        6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊; 
        7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 
        8、酒精燈1臺(tái);

        實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
        一、分離與培養(yǎng):
           1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;
           2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
           3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
           4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
           5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
        二、免疫熒光鑒定:
           1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
           2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
           3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
           4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
           5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
           6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微
        鏡下觀察圖像并拍照。

        注意事項(xiàng):
             盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
             如果有細(xì)菌或真菌污染,會(huì)嚴(yán)重影響檢測效果。
             染色后宜盡快檢測,時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
             如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗。
             熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間,同時(shí)在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
             用于流式細(xì)胞儀檢測時(shí),如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞。
             需自備PBS。
             本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
             為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
        熱噬淀粉芽孢桿菌拉丁屬名: Fusarium solani

        腐皮鐮孢拉丁屬名: anthracis

        炭疽芽孢桿菌拉丁屬名: coli

        大腸埃希菌拉丁屬名: Pseudomonas prosekii

        假單胞菌屬拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum subsp. plantarum

        植物乳桿菌植物亞種拉丁屬名: Bacillus  subtilis

        枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Streptomyces narbonensis

        那波鏈霉菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

        生癌腸桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

        干小皮傘拉丁屬名: Aspergillus  niger

        黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus versicolor var. versicolor

        雜色曲霉原變種注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

        松口蘑拉丁屬名: Bifidobacterium  longum

        長雙歧桿菌拉丁屬名: Staphylococcus  pseudintermedius

        假中間葡萄球菌拉丁屬名: Verrucosispora sp.2801AT45

        疣孢菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
        PCS-3M細(xì)胞衰老抑制因抗原雙氫苯甘氨(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

        環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗原雙(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

        降鈣素抗原雙水二氨環(huán)已烷鉑二硝鹽(奧沙利鉑雜質(zhì))(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

        C端結(jié)合蛋白1抗原水楊(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

        淋巴相關(guān)抗原4/性T抗原-4水楊鎂(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

        心肌肌鈣蛋白水楊片(不含水楊對照品)Human, Mouse

        間隙連接蛋白32抗原水楊酰(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

        間隙連接蛋白36抗原順鉑(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

        間隙連接蛋白40(多肽)司帕沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat


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