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        MLO-Y4 細胞

        產品簡介

        MLO-Y4 細胞公司相關產品:
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        白花前胡素雙氫 中檢所 100mg CASPASE-9蛋白表達西方雜交分析試劑盒

        更新時間:2021-08-30
        訪問次數(shù):893
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        注意事項:
             盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個月內推薦4℃保存,并適當注意避免反復凍融。
             如果有細菌或真菌污染,會嚴重影響檢測效果。
             染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
             如果細胞收集過程中使用了胰酶,需注意設法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導致染色失敗。
             熒光物質均易發(fā)生淬滅,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
             用于流式細胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞,并且通過調整相關設置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞。
             需自備PBS。
             本產品于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
             為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
        產品名稱:小鼠骨樣細胞
        英文簡稱:MLO-Y4 細胞

        貨號:LZ-X969657
        規(guī)格:T25
        生長特性:貼壁

        圖片2.jpg 

        我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產品現(xiàn)貨,公司產品僅用于科研超低比價,產品貨期短,價格優(yōu),售后齊全。

        凍存培養(yǎng)基:
        凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
        1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 
        2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
        培養(yǎng)細胞凍存方案:
        以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書。 
        1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
        2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
        3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
        4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
        注:離心速度和時間取決于細胞種類。
        5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
        6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
        7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

        圖片2.jpg 

        實驗報告:
        一、分離與培養(yǎng):
           1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;
           2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
           3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
           4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
           5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
        二、免疫熒光鑒定:
           1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
           2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
           3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
           4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
           5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
           6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微
        鏡下觀察圖像并拍照。
        實驗材料: 
        1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
        2. 100ml滅菌燒杯2個;
        3、50ml離心筒2個 
        4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個 
        5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個 
        6、細胞計數(shù)板1塊; 
        7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 
        8、酒精燈1臺;

        大車前苷固相RNase清除劑 冰凍切片組織線粒體復合物V蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

        大豆苷固相RNase清除劑 冰凍切片組織組蛋白H3-K4甲基化NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

        大豆苷元液相RNase清除劑 冰凍切片組織組蛋白H3-K9甲基化NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

        大豆皂苷AaRNAsaver(RNA長效保存液) 冰凍切片組織組蛋白NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

        大豆皂苷AbEB染色液 溴化乙錠   紅色熒光核酸染料   GoldView   gelred  (10000X) 二(MDA)終點比色法定量檢測試劑盒

        大豆皂苷AcEB染色液 溴化乙錠   紅色熒光核酸染料   GoldView   gelred  (10000X) 茶水氟元素比色法定量檢測試劑盒

        大豆皂苷BaGoldView I型核酸染色劑(10000×) 超氧化物歧化酶(SOD)活性終點比色法定量檢測試劑盒

        大豆皂苷BbGoldView II型核酸染色劑(5000×) 超氧陰離子自由基終點比色法定量檢測試劑盒

        大豆皂苷BdSYBR Green I(電泳級,10000×) 蛋白免疫共沉淀分析試劑盒-LEPTIN

        大豆皂苷BeSYBR Green I(電泳級,10000×) 電鏡樣品固著液(Karnovsky固著液)

        大豆皂苷Be甲酯SYBR Green I(電泳級,10000×) 豆制品維生素U(S-Methylmethionine)比色法定量檢測試劑盒

        大果桉BSYBR Green II(電泳級,10000×) 鈣ATP酶PMCA蛋白表達西方雜交分析試劑盒

        大花羊藿苷FSYBR Green I(電泳級,20X) 鈣ATP酶SERCA蛋白表達西方雜交分析試劑盒

        大黃酚SYBR Green II(電泳級,10000×) 鈣鈉交換體(NCX)蛋白表達西方雜交分析試劑盒

        大黃酚-8-O-葡萄糖苷SYBR Green II(電泳級,10000×) 肝脾組織樣品固著液(Helly固著液)
        MLO-Y4 細胞氧氣調節(jié)蛋白150抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量206-288萬) Hydrazine sulfate

        氧化應激反應蛋白1抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量26-36萬) Cyclandelate

        固生蛋白M抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量3-5.5萬) Nitrilotriacetic acid

        末端多聚腺苷1蛋白抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量36-48萬) 1,3- Propylene Glycol

        嗅球蛋白3抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量48-73萬) Diethylene Glycol

        轉錄因子OTX1抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量5.5-9 萬) Chlorothiazide

        轉錄因子OTX2抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量73-102萬) 4-amino-6-chloro-1,3-benzenedisulfonamide

        轉錄因子OTX1+OTX2抗體酯封端左旋聚乳(重均分子量9-17萬) Alkene

        增食欲素B/欲激素B(3R,4R)-N,4-二-1-(苯)-3-... N-Methylparoxetine

         


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